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硫酸铵饱和度常用计算表

2006-03-26 23:20 生物实验技术编辑组 bioguider.com 阅读 0
核心摘要: 本文介绍了硫酸铵沉淀法在蛋白质分离中的应用,提供了25℃下常用的硫酸铵饱和度计算表及操作说明,并解释了盐析机制。适用于实验室蛋白纯化参考。

硫酸铵沉淀法是蛋白质分离与纯化实验中常用的经典技术。该方法通过调节硫酸铵溶液的饱和度,使不同蛋白质依次沉淀,从而实现分离。硫酸铵的饱和度与溶液温度密切相关,通常以25℃为标准。以下为常用的硫酸铵饱和度计算表,便于实验人员快速查阅。

硫酸铵溶液饱和度计算表(25℃)

目标饱和度(%)每升溶液需加硫酸铵(g)
1056
20114
25144
30176
33196
35209
40243
45277
50313
55351
60390
65430
70472
75516
80561
90662
100767

使用方法:假设要将1升溶液从0%饱和度调整至50%,需加入313克硫酸铵。若已含一定饱和度,则需查表计算差值。

机制解释:硫酸铵能够通过“盐析”作用降低蛋白质溶解度,使其逐步沉淀。不同蛋白质在不同饱和度下沉淀,适用于蛋白分级分离。实验时应缓慢加入硫酸铵并充分搅拌,避免局部过饱和导致蛋白变性。

参考文献:
1. Englard S, Seifter S. Precipitation techniques. Methods Enzymol. 1990;182:285-300.
2. Scopes RK. Protein Purification: Principles and Practice. Springer, 1994.

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