早期曾推荐使用25℃为酶测定温度，其优点为接近室温，反应体系温度很容易平衡到此温度，这对于当时使用无有效控温系统的分光光度计来测酶活化性有其特别方便之处。但温度低。反应太慢。在有些温热地区，当室温超过25℃时，还需使用降温系统很不方便。因此目前已很少有实验室采用此温度。

　　IFCC推荐的30℃，兼顾了上述二温度的优点，即保证了一定的反应速度。又无酶失活之扰，此外还有一个上述二温度没有的优点，即可以镓作为此温度的基准物质，纯镓的熔点为29.77℃。保证了测定系统计30℃的高度准确性，而37℃和25℃至今尚无一个最准确的确定方法。

　　30℃和37℃是目前使用最广泛的二种测定酶的使用的温度。在比较不同实验室测定结果时，一定要注意由此引起来的差异，否则将导致临床诊断的困难和误差。一些作者提出使用二温度间的转换系数使二温度测定结果的比较变为可比。虽然一些作者持怀疑态度，用一个系数能代表所有标本中的变化情况吗？最新研究证实只要所用方法合适，人类血清中酶对温度变化的反应差异不大，在无法统一温度情况下，这还不失为一权宜之计，常用酶的温度转换系数可参见表17-4：

表17-4　常见酶温度转化系数

　　不论选用何种温度测酶，由于酶反应受温度影响很大，在测定时间内，反应体系的温度变化应控制在±0.1℃内。应用国产普通恒温水浴箱来测酶活性是不合适的，应使用带有搅拌器的高级恒温水浴。