此法特异性高，标本不需去蛋白，特别适用于自动分析。但工具酶过多、价格昂贵。

　　正常参考值：血浆肌酐44-133μmol/L。

　　血尿素浓度除受肾功能影响外，还受到蛋白质分解代谢引起的变化，如高蛋白饮食、胃肠道出血、口服类固醇激素等都可使血尿素浓度增高。而肌酐摄入、生成量恒定，故血肌酐测定较血尿素测定更能准确地反映肾小球功能，但反应较迟钝。

　　肾功能不全的代偿期可见BUN轻度增高（＞7.0mmol/L），肌酐可不增高或轻度增高；肾功能衰竭失代偿期，BUN中度增高（17.9-21.4mmol/L），肌酐也中度增高（442.0μmol/L）；尿毒症时BUN＞21.4mmol/L，为尿毒症诊断指标之一，肌酐可达1.8mmol/L。

　　⒊血清尿酸（serum uric acid，SUA）尿酸是嘌呤类的终末产物，血尿酸主要从肾脏排出，肾功能减退时SUA增高。尿酸从肾小球滤过后在肾小管中重吸收和分泌，最后排出滤过量的8％，在严重衰竭时肾小管分泌大增，可达滤过量的85％被排出，慢性尿毒症时SUA的增高程度不明显。

　　尿酸测定方法可分为两大类：磷钨酸还原法和尿酸酶法，目前以尿酸酶法为主。

　　⑴磷钨酸法：是利用在碱性环境中尿酸具有还原性，无蛋白血滤液中的尿酸可使磷钨酸还原生成蓝色的钨蓝，可进行比色测定，反应如下：

　　尿酸＋磷钨酸→尿囊素＋CO₂+钨蓝

　　此法的不足之处是特异性不高，显色褪色速率变化不定，灵敏度低。

　　⑵尿酸酶法：尿酸酶测定方法可分为三种类型：

　　1)紫外分光法：尿酸在282-292nm处有特异吸收峰，当其经尿酸酶作用后，产物在此波长范围无吸收峰，测量酶作用前后吸光度之差，经标准品、测定样品同时处理，可计算尿酸含量。该法灵敏度高，特异性强，其它物质无干扰，可用血清直接测定，不需沉淀蛋白，易于自动化，具有简单、快速的优点。

　　2）酶联比色法：尿酸经尿酸酶作用生成的H₂O₂，可用偶联的过氧化物酶（POD）使H₂O₂氧化还原色素原，成为氧化型而显色，用酚和4-氨基安替比林作生色原。反应如下：

　　反应生成的红色醌亚类化合物，在500nm处有最大吸光度，吸光度的增加与样品中酸含量呈正比，可进行比色测定。此法敏感，反应所产生的颜色比用酚作色素原时产生的颜色强度大4倍，可用血清直接测定。

　　3)酶联-紫外分光法：尿酸酶将尿酸氧化时生成的H₂O₂的存在下同乙醇作用生成乙醛，后者被偶联的醛脱氢酶（ALDH）进一步氧化生成乙酸，伴随着NAD+变成NADH，在340nm测定由NAD+还原产生的光吸收增加与样品中尿酸含量成正比。反应式如下：

　　此反应第一步是特异的，但后面的氧化还原反应易受干扰，因体内有许多脱氢酶反应，亦可氧化内源性底物而伴有NAD+还原生成NADH，导致结果偏高。除以上方法外，固相酶技术的发展使测定更简单，更易自动化。尿酸酶的固相化有以下几种类型：①固相尿酸酶与氧电极相联，测定尿酸氧化时的耗氧量；②固相尿酸酶及过氧化物酶与显色法结合；③夹心固相酶-荧光法，使产生的H₂O₂与对羟基苯乙酸反应产生荧光，此法具有酶反应的特异性及荧光法的灵敏度。

　　正常参考值：血尿酸：男性148.7-416.4μmol/L，女性89.2-356.9mol/L．

　　㈡肾血流量测定

　　测定对氨基马尿酸（PAH）清除率或碘锐特清除率均可反映肾血流量．对氨基马尿酸（PAH）主要由近端小管分泌排出．当血浆中PAH浓度很低时流经肾脏，90％从肾脏清除而排入尿中，即流经肾脏的PAH大部分被清除．PAH清除率相当于流经肾脏的血浆量，称为有效肾血浆流量（ERPF）。PAH为外源性物质，操作复杂，临床上多不采用。放射性核素（同位素）肾图能比较敏感地反映肾的血浆流量，目前临床上将其列为肾功能的常规检查。

　　㈢肾小管功能检查

　　肾小管的功能比较多，除了具有强大的再吸收水分与一些物质的能力外，还具有选择分泌与排泄一些物质的能力。到目前还没有理想的肾功能试验适用于临床。生理研究中的肾小管葡萄糖最高再吸收率（TmG）和对氨基马尿酸最大排泄率（TmPAH），可较好地代表肾小管再吸收与排泄的功能，但操作麻烦，不适合临床应用，多以尿液浓缩-稀释试验和酚红排泄试验作为肾小管的功能试验。近年来尿中酶的测定和自由水清除值等的测定逐步使肾小管功能试验简单、灵敏、快速，更适用于临床。

　　⒈近端小管功能检查 酚红排泄率可作为判断近端小管排泄功能的粗略指标。酚红注入体内后，94％由近端小管上皮细胞主动排泄，从尿液排出。由于酚红排泄试验受肾血流量及其它肾外因素影响较大，对肾小管功能敏感不高，故目前基本不用。以测定尿β₂-微球蛋白及溶菌酶等估计近端小管功能。

　　⒉肾浓缩稀释试验 肾浓缩和稀释尿液功能主要在远端小管和集合管进行。在日常或特定饮食条件下观察病人尿量和尿比重的变化，称为浓缩稀释试验，作为判断远端小管功能的指标。（以上二试验在临床检验中已详尽叙述，本章略。）

　　⒊尿渗透压测定 液体的渗透压是由溶液中溶质的毫摩尔浓度决定的，尿液渗透压反映尿液中溶质的摩尔数。尿比重和尿渗透压都能反映尿中溶质的含量，但尿比重易受溶质微粒大小和性质的影响，如蛋白质、葡萄糖等均可使尿比重增高；而尿渗透压则反映尿中各种溶质微粒的总数目，而与溶质分子相对重量、微粒体积大小无关，因而测定尿渗透压较测定尿比重更好，更能反映肾浓缩和稀释能力。

　　目前多采用尿液冰点下降法测定渗透压，也可用蒸气压渗透压计算法测定。溶液的渗透压增加，使其冰点降低。以纯水的冰点0℃为标准，任何溶液的冰点都比纯水为低，均为负值。冰点愈低，负值愈大，表明溶液中的渗透浓度越大。1渗量的溶质可使1kg水的冰点下降1.858℃，因此溶质渗透压等于冰点下降数除以1.858。

　　渗透压（Osm/kgH₂O）＝测得溶液冰点下降度（0C）／1.858

　　测定尿渗透压（Uosm）的方法有三种：①直接测定尿渗透压；②测定尿、血浆渗透压（Posm）的比值；③自由水清除率。

　　正常尿渗透压为600-1000 Osm/kg H₂O。

　　尿渗透压和血浆渗透压相比，当尿渗透压高于血浆渗透压时，表示尿已浓缩，称为高渗尿；低于血浆渗透压表示已稀释，称为低渗尿；若与血浆渗透压相等为等渗尿，反映肾脏浓缩功能严重损害。

　　⒋自由水清除率 自由水清除值指单位时间内使尿液达到等渗，而应从尿中减去或加入的纯水量。在尿浓缩时，排出的尿量等于渗透尿量减去被总吸收的纯水量；在尿稀释时，排出的尿量等于等渗透尿量加上血浆中清除的纯水量。等渗尿量实际上就是渗透性溶质清除率，又称渗量清除率（Cosm）。它表示单位时间内肾脏能够将多少血浆中的渗透性溶质清除出去。

　　Cosm＝Uosm/Posm×V（单位时间尿量）

　　由于V＝Cosm＋CH₂O，因此CH₂O的计算公式是：

　　CH₂O＝（l/Uosm/Posm）×V

　　自由水清除率正值代表肾稀释能力，负值代表肾脏浓缩能力；若CH₂O等于或接近于0，则表示肾不能浓缩和稀释尿液，是肾功能严重损害的表现。因此，进行尿液浓缩试验时，自由水清除率的正值变小而接近于0，表示肾稀释功能受损，正常人常为－25-100ml/h。因在急性肾功能衰竭早期CH₂O趋于0，CH₂O呈现负值大小可反映肾功能恢复的程度，所以此测定对急性肾功能衰竭的早期诊断及病情变化有一定价值。

　　⒌肾小管对尿液的酸碱调节功能——H+总排泄量测定 正常饮食情况下，每天代谢产生50-100ml非挥发性酸，并从尿液中排出，主要经过肾小管分泌。若这么多酸都以游离的H+排除，则尿液的pH应小于2，但实际上正常尿液的pH在5-6之间，因此大部分H+是被缓冲后排出的。

　　肾小管以三种方式排酸：

　　⑴直接排H+，这部分可用pH计进行测定。

　　⑵和磷酸根、硫酸根及其它有机化合物结合。如HPO₄3-＋H+→H₂PO₄2-，pH4.5时，尿中磷酸盐几乎全部以H₂PO₄2-存在，这部分酸加上游离H+可通过酸碱滴定来测定，称为可滴定酸度（UTA）。

　　⑶以NH₄+形式排出，NH₃在肾小管腔中与H+结合为NH₄+排出体外。假定尿中无HCO₃-排出，则H+总排泄量（UH）为：UH＝UTA＋UNH₄+；当尿中有HCO₃-排泄时，则机体每排泄1mmol HCO₃-，必回收1mmol H+。所以肾的H+总排泄量应为：UH＝UTA＋UNH₄-－HCO₃-在肾脏某些疾病时，肾小管排酸能力可能出现障碍，血液中有磷酸盐、硫酸盐、有机酸滞留，导致代谢性肾性酸中毒，主要见于各型原发性肾小管酸中毒症。

　　⒍尿钠的测定 尿钠浓度可作为估计肾小管坏死程度的指标。尿钠排泄量多少取决于胞外液量及肾小管重吸收的变化，在鉴别急性肾功能衰竭和肾前性氮质血症时有意义。肾前性氮质血症是由于肾血流量灌注不足引起的肾功能损害，若缺血严重或持续时间延长（超过2小时），则可引起急性肾小管坏死，是急性肾功能衰竭的前奏曲。在急性肾衰时，肾小管功能受损，不能很好地重吸收钠，故尿钠浓度＞40mmol/L；而肾前性氮质血症的肾功能没有损坏，由于血容量不足，肾小管最大限度地重吸收钠，以维持血容量，故尿钠浓度＜20mmol/L；若尿钠在20-40mmol/L之间，则表明病人正在由肾前性氮质血症向急性肾衰发展。

　　滤过钠排泄分数（FeNa）对鉴别肾前性氮质血症和急性肾衰有特别意义。以尿钠浓度表示肾小管功能状况不正确的理由是易理解的。尿钠浓度与自由水清除值呈反比，而醛固酮和抗利尿激素可使尿钠浓度向相反方向转变。FeNa则不受上述因素影响，故能正确地反映肾小管的功能。FeNa的定义为肾小球滤过的钠经肾小管重吸收后，由肾排出的百分率。

　　尿钠和血钠的单位为mmol/L，尿肌酐和血肌酐单位为μmol/L

　　尿标本、血标本应为同一时间采集的。在急性肾衰时，FeNa＞1（主要是根据急性肾衰时，尿钠浓度增高和尿肌酐/血肌酐比值下降的原理）。肾前性氮质血症FeNa＜1。

　　三、早期肾损伤的生化诊断

　　蛋白尿是肾脏疾病的一个重要指标，在某些肾脏病早期，尿常规测定常为阴性，尿中蛋白质含量实际已有微量的增加。为早期发现肾脏疾病，必须做一些尿中微量蛋白的检测，以监测肾脏以及某些其它器官的功能状态，提供可靠的生化指标。随着免疫化学技术的发展，已能检测纳克/ml（ng/ml）水平的微量蛋白尿，对肾脏及肾脏有关疾病的早期诊断具有重要的意义。

　　尿微量蛋白是指常规定性或定量难以检出的一些尿蛋白，其理化性质、合成部位、生理功能都各不相同。正常情况下，尿中这些蛋白质总含量仅为微克至毫微克水平，某些肾脏疾病或尿路其它部位分泌的蛋白可在病理乃至正常情况下出现于尿中。目前最常检查的有：白蛋白（albumin，Alb）、转铁蛋白（transferrin，Tf）、α₁-微球蛋白（α₁-microglobulin，α₁m）、β₂-微球蛋白（β₂-microglobulin，β₂m）、溶菌酶（lysozyme，LYS）、TH糖蛋白（Tamm-Horsfall protein，THP）、纤维蛋白降解产物（fibrin degradation products，FDP）、C₃、IgG、IgA、IgM、本周蛋白（Bence-Jones protein，B-JP）、视黄醇结合蛋白（retinal binding protein，RBP）、N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶（N-acetyl-β-D-glu-cosaminidase，NAG）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、α₂巨球蛋白（α₂-macroglobulin，α₂-MG）等。