如何为膜片钳记录选择合理壁厚的微电极玻璃毛细管?
用厚壁的玻璃毛细管制备的电极,其尖端的壁厚和端缘面积比用薄壁毛细管制备的电极大很多,甚至可达到2倍。厚壁硬质电极的优点在于:1. 壁越厚的电极,其跨壁的分布电容越小(与壁厚成反比),更有利于低噪声的记录;2. 壁越厚的电极,越容易获得吉欧封接的稳定性,而吉欧封接的成功率也往往比薄壁电极高很多。 厚壁电极也有相应的缺点,其针颈锥缩角比薄壁电极的小很多,同时有着细而长的针颈,加上较小的内径,导致很大的电极电阻,不利于大电流的全细胞记录。通过在拉制仪上设定多次的短拉伸,这一缺点可以得到一定程度的克服。 然而,可能更重要的是电极尖端的尺寸,对于直径30-40μm的大细胞,适宜膜片钳封接的电极尖端尺寸在4-5μm范围,用薄壁毛细管能够稳定地制备;对于直径10-20μm的小细胞,适宜封接的电极尖端尺寸在1-2.5μm范围,一般用厚壁毛细管制备。 厚壁电极比薄壁电极的尖端锥缩角小得多,无论对于细胞膜的吸入还是吸破都有不同的表现,这是不同的记录构型(细胞贴附/内面向外/外面向外/全细胞)需要考虑和试验的。 (责任编辑:泉水) |