5．11 维生素B₁₂

　　5．11．1结构与性质

　　维生素B₁₂（VB₁₂）为钴胺素（Cobalamin）类化合物，他的分子中有4个还原性吡咯环联结在一起，这种构叫做咕啉，他与核苷酸（二甲基苯异咪唑）及核糖相联，另一方面与D-1-氨基-2-丙醇相连，钴与核苷酸之N相偶联（图5-31）。化学上称氰钴胺素为维生素B₁₂，除CN后称钴胺至少。CN可为其他基团代替，成为不同类型的钴胺素。一般称对哺乳类有生理作用的为钴胺素，称对哺乳类及微生物都有作用的为维生素B₁₂。本文中维生素B₁₂泛称此类物。

　　氰钴胺至少自然界很少，为人工合成产品，可从其他类型转换而来。他是红色结晶，其活力为重金属及氧化还原剂所破坏，但在短期高压消毒（12℃）不被破坏，能溶解在1：80水中，溶液为中性，在PH4.5～5时最稳定。

　　辅酶B₁₂（即5‘-脱氧腺钳钴胺素）（图5-32）及甲基B₁₂（甲基钴胺素）为哺乳类（人类）组织中最主要的辅酶形式。前者在线粒体内，后者在胞浆内，为合成蛋氨酸所必需者。它们对光不稳定，光解后形成水钴胺素。在氰存在下变成氰钴胺素，维生素B₁₂、B_12a、B_12b、B_12c都可治疗维生素B₁₂的缺乏。

图5-31　氰钴胺素分子式（CN可以其他基团代替）

图5-32　辅酶B ₁₂分子式

　　5．11．2　代谢

　　食物中维生素B₁₂与蛋白质结合，在胃酸与胃蛋白酶作用下释放出来，又与胃中R蛋白结合，在PH2与8情况下，维生素B₁₂与R蛋白亲和力要比与内因子（Intrinsic　　　　factor,IF）的亲和力分别大50与3倍。因此，维生素B₁₂不能从与R蛋白结合转至IF结合。在小肠中维生素B₁₂-R复合物分解，在10min内维生素B₁₂转移与IF结合。在小肠中维生素B₁₂与IF结合。R蛋白不但在胃中有，唾液、胆汁及其他人体液中也有。IF与胃粘膜壁细胞内质网系统相联系，维生素B₁₂-IF对蛋白酶很稳定。有及猪的每gIF可结合30μg维生素b ₁₂进入肠细胞内，在细胞表面游离的IF又可与维生素B₁₂结合。但有人认为IF也进入细胞内。

　　维生素B₁₂从肠细胞排出到门静脉与血浆中结合蛋白结合。人血浆中有三种维生素B₁₂运输蛋ⅠⅡⅢ（即transcobalaminⅠ、Ⅱ、Ⅲ；TCⅠ、TCⅡ、TCⅢ）。TCⅠ即血浆R蛋白，血浆中80～100%的维生素B₁₂与之结合。TCⅡ在肝中合成，1molTCⅡ与1mol维生素B₁₂或其类似物相结合，血浆中只有10～20%的维生素B₁₂与之结合，它的主要作用是将维生素B₁₂从肠运输至其他组织，如肝、肾、能髓、红细胞、胎盘等。在这些靶组织上有他的受点，将TCⅡ-维生素B₁₂包入，在溶酶体内将其分解，但有人认为分解的场所为溶酶体膜或胞浆内。

　　TCⅠ及TCⅢ的功用可能一方面保护维生素B₁₂不为细菌所用，另一方面可能将维生素B₁₂类似物如类咕啉及钴胺酰胺从水消化道及体内清除出去。在体内清除是将TCⅠ（或TCⅢ）-维生素B₁₂类似物的复合体进入到肝细胞的溶酶体内将其分解，然后维生素B₁₂类似物由肝排出至胆汁中，其再吸收可能性不大，因IF与维生素B₁₂类似物结合能力比较弱。

　　维生素B₁₂消化吸收与运输，需要多种因至少参加，因此较易发生维生素B₁₂缺乏。①从食物中摄取量不够，尤其长期素食者维生素B₁₂很容易缺乏；②胃酸过少，不能分解食物中蛋白-维生素B₁₂复合体；③胃切除太多，没有足够胃粘膜产生足够的IF；④胰蛋白酶量不足以分解R蛋白-维生素B₁₂复合体，以致IF与维生素B₁₂结合减少；⑤回肠疾病，IF-维生素B₁₂复合体的受体减少，影响吸收；及⑥TCⅡ运输蛋白缺乏，影响体内运输。

　　5．11．3　生理功能

　　1）在人及哺乳动物中有二种生化反应需要维生素B₁₂作为辅酶。

　　（1）甲基丙二酸与琥珀酸的异构作用

　　这一反应为可逆的，由甲基丙二酸CoA变位酶催化，其辅酶为辅酶B₁₂，使分子内部重新排列。甲基丙二酸-CoA，可从丙酸、异亮氨酸、缬氨酸而来。甲基丙二酸变为琥珀酸CoA后，可进入到代谢途径。维生素B₁₂缺乏者，尿中甲基丙二酸排出量增多。

　　（2）高半胱氨酸甲基化变成甲硫氨酸（蛋氨酸）　高半胱氨酸在N⁵-CH₃THFA及高半胱氨酸甲基转移酶作用下，接受甲基变成蛋氨酸。在这个酶系统中，甲基B₁₂为辅助因子，还需要δ腺甘蛋氨酸及NADH。甲基从⁵N-甲基THFA转移至维生素B₁₂，再转移至高半胱氨酸上而奕为甲硫氨酸。

　　2）维生素B₁₂缺乏症与生化功能的关系　维生素B₁₂缺乏并不是为巨红细胞型贫血及神经系统的疾患。神经系统的症状，起初为隐性的，先由周围神经开始，手指有刺痛感，后发展至脊柱后侧及大脑，记忆力右减退，易激动，嗅味觉不正常，运动也不正常等等。其主要原因为神经脱髓鞘。这个作用与已知的生化功能尚无明确的联系。

　　维生素B₁₂缺乏的另一症象为巨红细胞型分血。缺乏维生素B₁₂的贫血与缺乏叶酸者是一样的。现在用“甲基THFA陷阱”假说来解释，在高半胱氨酸转变为蛋氨酸的反应中，N⁵-甲基THFA，将甲基转移出去，变成THFA，这个反应需要维生素B₁₂参加，如果维生素B₁₂缺乏，这个反应不能进行，N⁵-CH₃THFA不能转变为THFA，而且N⁵-CH₃THFA为体内THFA的主要储存形式，所以导致叶酸（THFA）功能性的缺乏，不能形成其他THFA衍生物以携带1-C基团，而影响体的一些代谢，如嘌呤及胸腺嘧啶核苷酸的合成及组氨酸的代谢等。

　　维生素B₁₂缺乏时的生化上变化也证实了“甲基THFA陷阱”假说，①恶性贫血而消化道无疾患，叶酸摄取量正常的病人，血浆N⁵-CH₃THFA水平高，可用维生素B₁₂来纠正；②维生素B₁₂缺乏病人血清中N⁵-CH₃THFA清除率慢，而其他叶酸衍生物清除速率快，以上两点都说明缺乏维生素B₁₂，N⁵-CH₃THFA转变为THFA的反应不能顺利进行；③维生素B₁₂缺乏病人，给予大剂量组氨酸后，尿中亚胺甲基谷氨酸排出量比正常者要多，这是由于亚胺基THFA的合成受阻而影响组氨酸代谢，所以其中间代谢产物从尿中排出；④尿中5-氨基咪唑-4-甲酰胺，维生素B₁₂缺乏病人增多，他是合成次黄嘌呤核苷酸的中间产物，需要进一步甲酰化才能变成次黄嘌呤，维生素B₁₂缺乏，THFA减少，不能进行甲酰化，所以上述变化与叶酸缺乏是一致的。

　　5．11．4来源

　　植物性食品中维生素B₁₂含量甚少，豆类根瘤菌可合成一些。肉及乳中较多，人结肠中的微生物可以合成维生素B₁₂，但不能吸收，在粪便中排出。素食者可能从微生物污染的食物及水中获得一些。食物中维生素B₁₂主要为辅酶B₁₂或甲基B₁₂，而且与蛋白质相结合，对热稳定，在碱性中不稳定，在维生素C存在于也不稳定。牛乳经巴氏消毒法损失7%，煮2～5min损失30%，119～129℃消毒13min损失77%，但快速消毒（143℃）仅损失10%。

　　5．11．5需要量

　　维生素B₁₂体内储存量为1～10ng，其中50～90%存于肝内。辅酶B₁₂为主要储存形式，甲基B₁₂为运输形式。体内储存的维生素B₁₂，可维持不摄取维生素b ₁₂者的健康达3～6年之久。

　　最低需要量为维持正常机体的正常功能的必须的外源摄入量。维生素B₁₂最低需要量为0.1μg·d^-1。

　　最低需要量（单位·d^-1）=（体内可利用的储存量）/停止摄取后到发生缺乏的时间）（日），

　　美国供应量，成人、儿童、孕妇分别为3、2、4μg（估计食物中维生素B₁₂有50%被吸收），FAO提出供应量成人为2μg，1～3岁0.9μg，4～9岁1.5μg，10岁以上2μg，孕妇3～4μg，乳母2.5μg，婴儿（人工喂养）0.3μg。