（八）用限制性内切酶法检测羊水细胞的有关基因

　　此法比DNA杂交法优越，可直接从20ml羊水细胞中提取DNA，不需培养，且可用于妊娠早期作产前诊断。由于基因突变可以造成某种限制性内切酶切点的丧失或新切点的出现，这样使内切酶切出的DNA片断长度与正常基因的有差别。应用此法已对镰状细胞贫血作出确切的产前诊断。其方法是人类正常的珠蛋白DNA用限制性内切酶HpaⅠ来切割时，切点在距β-珠蛋白基因3′-末端5000个核苷酸处，切下的β基因包含在76000个碱基对（7.7kb）的DNA片段中。镰状红细胞血红蛋白S基因是β链第6位密码子密码突变，这一改变使得HpaⅠ切点发生变化，因而切割出的变异β基因存在于13000碱基对（13.0kb）片段中。这样通过用HpaⅠ切点的改变，观察能否在羊水细胞DNA切下13.0kb片段，即能诊断胎儿是否为镰状细胞贫血患者。此法还能预测α-珠蛋白生成障碍性贫血，方法是用限制性内切EcoRI或（BgⅡ）消化羊水细胞后，正常胎儿α肽链基因有23kb DNA片段，β肽链基因有5.5kb的DNA片段。而α珠蛋白生成障碍性贫血胎儿只有β链的基因而无α-肽链基因，故可准确地筛选出患此病的胎儿。

　　羊水生物化学检测远不止于这些，目前用它作氨基酸分析可检出精氨酰代琥珀酸尿症、胱氨酸尿症及遗传性烟酸缺乏症等遗传性代谢病。检测羊水中的粘多糖还可诊断粘多糖沉积病，测定羊水内的酶类活性能确诊先天性酶缺陷。由此可见羊水生化检查在产前诊断中具有重要的地位。

　　总之，妊娠时监测各项与胎盘功能、胎儿-胎盘复合体功能有关的生物化学指标，对于维持孕妇及胎儿的健康与安全，开展遗传优生咨询，搞好计划生育都具有非常实用的临床价值。表14-10列举了一些临床上常用的监护孕妇与胎儿安全的生化检查项目，实践中可酌情选择应用。

表14-10　常用的胎儿、胎盘功能及产前诊断的生物化学检查项目

（王继红　康格非）