引言
所有微生物学家的初步目标是可重复地培养微生物,无论这些微生物是自然来源还是经过人工基因工程改造。可重复的生长需要在特定的环境条件下进行,包括能量来源、温度、pH值和营养物质(详见微生物生长需求章节)。因此,Fluka提供了一系列产品和服务(见培养基列表、培养基比较等),旨在满足普通微生物学家和专业人士的需求。
微生物
微生物的分类包括简单的单细胞形式(球菌、杆菌、弧菌和螺旋菌)以及多细胞形式(丝状体和鞘体)。这一组生物包括蓝绿藻(蓝藻)、真菌、原生动物和细菌。
为了生存和生长,微生物需要能量和营养来源。细菌是最原始的微生物形式,但由多种简单和复杂的分子组成,能够进行广泛的化学转化。根据它们的需求和所用的能量来源,细菌被分为不同的营养组。
微生物的大小从病毒的微米级(只能在电子显微镜下观察)到几厘米的丝状藻类或真菌不等。
微生物生长需求
微生物的生长需要适宜的环境条件、能量来源和营养。这些需求可以分为物理和化学两类。
化学因素
微生物生长所需的元素与自然界中存在的化学形式相比,通常添加到微生物培养基中的化学形式如下:
| 生长需求 | 自然界中通常存在的形式 | 通常添加到微生物培养基中的化学形式 |
| 碳 | 二氧化碳(CO2)、HCO3-、有机化合物 | 有机;简单糖如葡萄糖、醋酸或丙酮酸;提取物如胨、酪蛋白、酵母提取物等。无机;二氧化碳(CO2)或氢碳酸盐(HCO3-) |
| 氢 | 水(H2O)、有机化合物 | |
| 氧 | 水(H2O)、氧气(O2)、有机化合物 | |
| 氮 | 氨(NH3)、硝酸盐(NO3-)、有机化合物(如氨基酸)、氮气(N2) | 有机;氨基酸、含氮碱基 无机;NH4Cl、(NH4)2SO4、KNO3,以及对于固氮细菌N2 |
| 磷 | 磷酸盐(PO43-) | KH2PO4、Na2HPO4 |
| 硫 | 硫化氢(H2S)、硫酸盐(SO42-)、有机化合物(如半胱氨酸) | Na2SO4、H2S |
| 钾 | K+ | KCl、K2HPO4 |
| 镁 | Mg2+ | MgCl2、MgSO4 |
| 钙 | Ca2+ | CaCl2、Ca(HCO3)2 |
| 钠 | Na+ | NaCl |
| 铁 | Fe3+、有机铁复合物 | FeCl3、Fe(NH4)(SO4)2、Fe-螯合物 |
| 微量元素 | 通常存在于非常低的浓度 | CoCl2、ZnCl2、Na2MoO4、CuCl2、MnSO4、NiCl2、Na2SeO4、Na2WO4、Na2VO4 |
| 有机生长因子 | 通常存在于非常低的浓度 | 维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶 |
*也可作为缓冲剂
1)为了促进铁在溶液中的溶解或保留,可能会向培养基中添加螯合剂,如EDTA或柠檬酸。
物理/环境因素
温度
大多数微生物在适合人类、高等植物和动物的正常温度下生长良好。然而,某些细菌能够在极端高温或低温下生长,通常这些温度下很少有高等生物能够存活。根据它们的最佳生长温度范围,细菌分为三类:嗜冷菌(喜冷微生物)主要生长在海洋深处、冰雪和北极地区,最佳生长温度在0°C到15°C之间,最高生长温度不超过20°C;中温菌(喜中温细菌)主要生长在水、土壤和高等生物中,是研究中最常见的微生物类型。它们的最佳生长温度在25°C到40°C之间。许多致病细菌的最佳温度为37°C,因此中温菌是我们常见的腐败和疾病微生物的主要组成部分;嗜热菌(喜热微生物)能够在高温下生长,最佳生长温度在60°C以上。有些生物能够在接近水的沸点甚至在100°C以上的压力下生长,大多数嗜热菌在45°C以下无法生长。
pH
大多数细菌在接近中性的pH范围(pH 6.5到7.5)中生长最好。那些在极端pH下生长的细菌被称为嗜酸菌(喜酸)或嗜碱菌(喜碱)。嗜酸菌在pH值低于4的环境中生长,有些细菌在pH值为1的环境中仍然活跃。嗜碱菌则偏好pH值在9-10之间,大多数无法在中性或以下的溶液中生长。在细菌生长过程中,通常会向培养基中释放有机酸,这会降低其pH,从而干扰或完全抑制进一步的生长。尽管常见的培养基成分如胨和氨基酸具有小的缓冲作用,但在大多数细菌培养基中需要外部缓冲剂来中和酸并维持正确的pH。磷酸盐是最常用的缓冲剂,因为它们在大多数细菌的生长范围内具有缓冲作用,且无毒,并提供磷这一重要营养元素。然而,高浓度的磷酸盐可能导致由于不溶性金属磷酸盐(如铁)的沉淀而造成严重的营养限制。
渗透压
微生物含有约80-90%的水,如果放置在溶质浓度较高的溶液中,将失去水分,导致细胞收缩(质壁分离)。然而,一些细菌已经适应了高盐浓度,实际上需要它们才能生长。这些细菌被称为嗜盐菌(喜盐),通常生长在盐田或死海等地区。